Anti-human skeletal muscle glycolipid antibodies in unstable angina.

BACKGROUND: We studied whether the level of anti-skeletal muscle glycolipid antibodies (AGA), a marker of acute rejection in heart transplantation, may be associated with an adverse prognosis in unstable angina. METHODS AND RESULTS: The in-hospital evolution of 50 patients with unstable angina (Braunwald class III B) was assessed. We determined the incidence of death, myocardial infarction, and refractory angina. Blood was collected at admission and 24 hours later for determination of AGA levels by enzyme-linked immunosorbent assay. Twenty-three patients showed a decrease in the AGA level at 24 hours after admission. Ten in-hospital cardiac events occurred in these patients (43.4%) as compared with 4 (14.8%) in the 27 patients who did not show a decrease (P =.025). In patients with previous myocardial infarction (n = 26), the AGA assay was a powerful predictor of outcome. In this subgroup, 66.6% of patients who had decreased AGA levels (8 of 12) had cardiac events as compared with 14.2% (2 of 14) of those who did not have that decrease (P =.001). CONCLUSIONS: We conclude that a decrease of AGA levels 24 hours after admission is associated with a complicated in-hospital course. This finding may provide new insights in the phenomenon of plaque instability involved in the development of acute coronary syndromes.

Anti-skeletal muscle glycolipid antibodies in human heart transplantation as predictors of acute rejection: comparison with other risk factors.

In forty-five patients who underwent orthotopic heart transplantation, the titer of anti-human skeletal muscle glycolipid antibodies (AGA) present in the sera at the moment of transplantation was correlated with the number of histologically diagnosed cellular grade 3A and humoral acute rejection episodes during the first 120 days after transplantation. Determination of a cutoff value of 0.800 for the AGA level was determined by a receiver operating characteristic curve. Thirteen of 19 patients (68.4%) with an AGA titer above 0.800 developed 24 severe rejection episodes, and of the 26 patients with an AGA titer below 0.800, only 4 (15.3%) presented 6 severe rejection episodes during that time. This was especially evident for the humoral rejection episodes, which were diagnosed in only 1 of the 26 patients with AGA below 0.800 and in 7 of the 19 with AGA above 0.800. Comparison by univariate analysis of other well-known risk factors for a greater number of rejection episodes during the early posttransplant period with the AGA level at the moment of transplantation revealed that the latter distinguished a greater number of patients at risk than the other factors, such as a female donor, the lymphocyte direct cross-match, or the status of the patients at transplantation; the odds ratios were 6.33 for the AGA level, 3.17 for the direct cross-match, and 2.76 for the status at transplantation. By multiple logistic regression analysis, the only relevant risk factors in our group of patients were the AGA level (P=0.0009) and the status at transplantation (P=0.0285). These results indicate that determination of the AGA level at the moment of transplantation could represent a useful method for distinguishing which patients are at risk for a greater number of rejection episodes during the early posttransplant period, with a greater sensitivity than other risk factors.

Anti-skeletal muscle glycolipid antibodies in human heart transplantation as markers of acute rejection. Correlation with endomyocardial biopsy.

In seventeen patients the result of the histological study of 153 endomyocardial biopsies (EMB) was compared with the ELISA titer of anti-human skeletal muscle glycolipid antibodies (AGA) present in serum samples collected simultaneously with the EMB procedure during the first four months following cardiac transplantation. The glycolipids were extracted from the quadriceps femoralis of blood group O patients. In the serum samples corresponding to the histological rejection grades with myocyte necrosis (greater than or equal to 2, International Society for Heart and Lung Transplantation grading) the AGA titer was significantly higher (P<0.005) than in the less severe rejection grades. The follow-up in each patient showed that the AGA titer raised in the serum samples collected immediately after, before, or coincidentally with a histological diagnosis of rejection grade 2 or 3A. In only one rejection grade 3A case was a false-negative result observed. Determination of the cut-off of the AGA level versus rejection grades 2 and 3A was determined by a relative-operating characteristic curve. An optical density (OD) of 0.040 showed maximum efficiency with sensitivity 53% and specificity 79%. Four patients who had AGA with an OD above 0.040 at the time of transplant had a significantly higher number of rejection grade 2 and 3A episodes than eleven patients with low pre-transplant AGA titers (P<0.05). These results indicate that search of anti-skeletal muscle glycolipid antibodies may represent a useful noninvasive method for monitoring heart rejection, and suggest that its investigation prior transplant may be a predictor of the number of grades 2 and 3A rejection episodes.

Presence of cells producing antiheart autoantibodies in the inflammatory infiltrate of chronic chagasic myocarditis.

Chagasic myocarditis is associated with the appearance of circulating antiheart autoantibodies. In order to find out if there was local synthesis of those antibodies we investigated, by means of a solid immunoenzymatic technique, the presence of cells secreting antibody (ASC) against syngeneic soluble heart antigens in the mononuclear cell (MNC) population isolated from the hearts of mice chronically infected with Trypanosoma cruzi. In seven animals the number of ASC ranged between 300 and 2080 per 10(6) MNC. A similar number of cells was observed when the assay was carried out with T. cruzi-soluble antigens. When the ASC were enumerated in an assay simultaneously with both antigens, their number doubled that found in the single antigen assay, suggesting that there was no cross-reactivity between the heart and the parasite antigens. These results indicate that some of the cells in the inflammatory infiltrate of chronic chagasic myocarditis synthesize IgG autoantibodies against heart antigens, a phenomenon which may lead to a local concentration of antibody large enough to induce tissue damage.

Antibody-dependent Cytotoxicity of Human Platelets Against Trypanosoma Cruzi.

Human platelets in the presence of sera from humans with chronic Chagas' disease display cytotoxic activity against Trypanosoma cruzi (T. cruzi) trypomastigotes. Adsorption of IgE from those sera decrease the cytotoxic effect and IgG purified from the same sera revealed a cytotoxic action similar to the whole sera. Morphological studies suggest that chagasic serum promotes adhesion between parasites and platelets. On the basis of these results it is postulated that platelets may represent a defensive mechanism in South American trypanosomiasis by killing circulating forms of the parasite and that both IgG and IgE are relevant for that action.

Presence of anti-Trypanosoma cruzi antibodies in the sera of mice with experimental autoimmune myocarditis.

The existence of antigens shared in common by T. cruzi and heart muscle cells is suggested by the presence of antibodies binding to the parasite surface in the serum of mice with autoimmune myocarditis induced by immunization with syngenic heart antigens.

Estudios inmunológicos en un modelo murino de enfermedad de Chagas / Immunological studies in a murine model of Chagas' disease

Los ratones infectados con T. cruzi desarrollan una miocarditis crónica con infiltrado de predomínio de linfocitos "helper" y macrófagos. En el bazo de los animales infectados aparecen linfocitos con acción citotóxica contra cardiocitos adultos singeneicos y en el suero se detectam anticuerpos que ejercen acción citotóxica dependiente de anticuerpo (CCDA) contra cardiocitos singeneicos con mononucleares esplénicos como células efectoras. Fue posible inducir miocarditis y trastornos electrocardiográficos por transferencia de linfocitos esplénicos de ratones chagásicos en receptores singeneicos. En cuanto a la posible existencia de epitopes compartidos entre el miocardio y el T. cruzi, se observó que la inmunización con fracciones subcelulares de T. cruzi o de Crithidia fasciculata produce una miocarditis con evidencia inmunológica de autorreactividad antimiocardio. Inversamente, los animales con miocarditis autoinmune inducida por la inmunización con antígenos cardíacos desarrollan anticuerpos que reconocen epitopes presentes en la membrana plasmática del T. cruzi. La inmunosupresión, si bien reactiva la infección, no modifica el curso de la cardiopatía excepto cuando se utiliza en forma asociada glucocordicoides y drogas tripanocidas, las que disminuyen dramáticamente los trastornos electrocardiográficos y en menor grado la miocarditis. En los animales tratados con drogas tripanocidas se observó la pérdida del estado de premunición a un desafio con dosis fetales de parásitos...

Estudios inmunológicos en un modelo murino de enfermedad de Chagas / Immunological studies in a murine model of Chagas disease

Los ratones infectados con T. cruzi desarrollan una miocarditis crónica con infiltrado de predomínio de linfocitos "helper" y macrófagos. En el bazo de los animales infectados aparecen linfocitos con acción citotóxica contra cardiocitos adultos singeneicos y en el suero se detectam anticuerpos que ejercen acción citotóxica dependiente de anticuerpo (CCDA) contra cardiocitos singeneicos con mononucleares esplénicos como células efectoras. Fue posible inducir miocarditis y trastornos electrocardiográficos por transferencia de linfocitos esplénicos de ratones chagásicos en receptores singeneicos. En cuanto a la posible existencia de epitopes compartidos entre el miocardio y el T. cruzi, se observó que la inmunización con fracciones subcelulares de T. cruzi o de Crithidia fasciculata produce una miocarditis con evidencia inmunológica de autorreactividad antimiocardio. Inversamente, los animales con miocarditis autoinmune inducida por la inmunización con antígenos cardíacos desarrollan anticuerpos que reconocen epitopes presentes en la membrana plasmática del T. cruzi. La inmunosupresión, si bien reactiva la infección, no modifica el curso de la cardiopatía excepto cuando se utiliza en forma asociada glucocordicoides y drogas tripanocidas, las que disminuyen dramáticamente los trastornos electrocardiográficos y en menor grado la miocarditis. En los animales tratados con drogas tripanocidas se observó la pérdida del estado de premunición a un desafio con dosis fetales de parásitos... (AU)

[Immunologic studies on a murine model of Chagas disease]. / Estudios inmunológicos en un modelo murino de enfermedad de Chagas.

In an experimental model, T. cruzi infected mice develop a chronic myocarditis with mononuclear infiltrates rich in CD4 lymphocytes and macrophages with scarce B and CD8 lymphocytes. The infected mice present in the spleen lymphocytes cytotoxic for adult syngeneic cardiocytes and in their sera antibodies able to induce antibody-dependent cytotoxicity (ADCC) against adult cardiocytes in a syngeneic system with spleen lymphocytes as effector cells. Myocarditis with electrocardiographic alterations was induced in naive recipients by transfer of lymphocytes from chagasic syngeneic mice. Immunization with subcellular fractions of T. cruzi led to a chronic myocarditis similar to that observed in infected animals; mice with autoimmune myocarditis induced by immunization with heart antigens developed antibodies which bind to T. cruzi epitopes. Glucocorticoids administered with trypanocidal drugs dramatically reduce the electrocardiographic alterations and to a lesser extent the myocarditis. Parasitological "cure" by treatment with trypanocidal drugs led to loss of the premunition state associated with the disappearance of antibodies able to induce complement-mediated lysis or ADCC against circulating forms of T. cruzi. However, both resistance against a challenge with a small number of parasites and cell-mediated anti T. cruzi immunity persisted. Our studies suggest that more than a single immunopathological mechanism is involved since anti-heart T cell cytotoxicity delayed type hypersensitivity and antiheart ADCC have been observed in chronically infected mice; this could be due to the existence of epitopes shared by the heart and the parasite.

Estudios inmunológicos en un modelo murino de enfermedad de Chagas. / [Immunologic studies on a murine model of Chagas disease]

In an experimental model, T. cruzi infected mice develop a chronic myocarditis with mononuclear infiltrates rich in CD4 lymphocytes and macrophages with scarce B and CD8 lymphocytes. The infected mice present in the spleen lymphocytes cytotoxic for adult syngeneic cardiocytes and in their sera antibodies able to induce antibody-dependent cytotoxicity (ADCC) against adult cardiocytes in a syngeneic system with spleen lymphocytes as effector cells. Myocarditis with electrocardiographic alterations was induced in naive recipients by transfer of lymphocytes from chagasic syngeneic mice. Immunization with subcellular fractions of T. cruzi led to a chronic myocarditis similar to that observed in infected animals; mice with autoimmune myocarditis induced by immunization with heart antigens developed antibodies which bind to T. cruzi epitopes. Glucocorticoids administered with trypanocidal drugs dramatically reduce the electrocardiographic alterations and to a lesser extent the myocarditis. Parasitological [quot ]cure[quot ] by treatment with trypanocidal drugs led to loss of the premunition state associated with the disappearance of antibodies able to induce complement-mediated lysis or ADCC against circulating forms of T. cruzi. However, both resistance against a challenge with a small number of parasites and cell-mediated anti T. cruzi immunity persisted. Our studies suggest that more than a single immunopathological mechanism is involved since anti-heart T cell cytotoxicity delayed type hypersensitivity and antiheart ADCC have been observed in chronically infected mice; this could be due to the existence of epitopes shared by the heart and the parasite.

Antiheart antibody-dependent cytotoxicity in the sera of mice chronically infected with Trypanosoma cruzi.

Sera of mice chronically infected with Trypanosoma cruzi contain antibodies that bind to the surface of living adult syngeneic heart muscle cells. In a syngeneic system, with nonadherent spleen mononuclear cells as effector cells and cardiocytes as targets, antibody-dependent cytotoxicity (ADCC), revealed by the liberation of creatine phosphokinase from damaged cardiocytes, was observed after incorporation of serum samples from infected mice. Target damage was decreased after absorption with syngeneic myocardium, but absorption with T. cruzi epimastigotes or trypomastigotes or with syngeneic skeletal muscle had no effect on ADCC. No complement-dependent lysis against heart muscle cells was detected in the same serum samples. These observations indicate that serum from chronically chagasic mice contain antibodies that bind to the surface of living adult syngeneic cardiocytes and are able to exert ADCC, suggesting that they could play a role in the pathogenesis of the heart damage that occurs in Chagas' disease.

Differences in resistance to reinfection with low and high inocula of Trypanosoma cruzi in chagasic mice treated with nifurtimox and relation to immune response.

Reinfection of chronic chagasic mice after treatment with nifurtimox resulted in different outcomes according to the number of parasites used for inoculation. Nifurtimox-treated chagasic animals injected with 2,500 trypomastigotes developed higher parasitemia and increased mortality compared with nontreated chagasic mice. When reinfection was done with 25 trypomastigotes, treated and nontreated animals showed similar parasitemias and mortalities, which were significantly higher in nonchagasic controls infected for the first time. Immunological studies showed that treatment with nifurtimox led to a decrease in anti-Trypanosoma cruzi antibodies engaged in parasite destruction, inducing either complement-dependent lysis or antibody-dependent cytotoxicity, but no difference in anti-T. cruzi cell-mediated immunity was found between treated and nontreated chagasic animals. It is concluded that treatment with nifurtimox leads to a loss of resistance to reinfection with a large number of trypanosomes, which is maintained with challenge with a few parasites, and that these two thresholds of premunition are probably associated with humoral and cell-mediated anti-T. cruzi immune responses, respectively.

Modification of the pattern of infection and evolution of cardiopathy in experimental Chagas disease after treatment with immunosuppressive and trypanocidal drugs

Con el fin de indagar si el tratamiento con drogas de acción inmunosupresora puede inducir un agravamiento o reactivación de la enfermedad de Chagas crónica, si esta eventual reactivación puede ser prevenida por la administración simultánea de una droga tripanomicida y si la inmunosupresión puede modificar la evolución de las alteraciones orgánicas en las que se postula la participación del daño histíco, se estudió la acción de dos drogas de frecuente uso en el humano, Betametasona y Ciclofosfamida, y su asociación con Nifurtimox, sobre la evolución de la infección cr¶nica del ratón con el Trypanosoma cruzi. La administración de Betametasona durante 30 días o de Ciclosfosfamida en dosis espaciadas cada 7 días no produjó mortalidad (Tabla 1), pero incrementó el número de animales que presentaban parásitos circulantes y disminuyó la proporción de ratones que presentaban anticuerpos determinantes de la lisis dependente de complemento de formas sanguíneas circulantes de T. cruzi (Tabla 2). La asociación con Nifurtimox previno el aumento de la incidencia de la parasitemia (Tabla 1). No se observó diferencia en la intensidad de las lesiones histológicas de músculo esquelético y cardíaco entre los animales tratados con Betametasona o Ciclofosfamida con los controles no tratados, en tanto que la asociación con Nifurtimox disminuyó las alteraciones del músculo esquelético pero no las cardíacas (Tabla 3). Llamativamente, la asociación de Betametasona con Nifurtimox redujo de manera significativa la incidencia de las alteraciones elkectrocardigráficas (Tabla 4). Se concluye que la administración de Betmetasona o de Ciclofosfamida reactiva la infección crónica del ratón con T. cruzi, que la administración simultánea de Nifurtimoz previene esa reactivación, y que la asociación de esta droga con Betametasona disminuye la incidencia de las alteraciones electrocardiográficas características de la infección crónica del ratón con T. cruzi (AU)

Supression of antibody dependent cytotoxicity to Trypanosoma cruzi in chronic chagasic mice after treatment with nifurtimox

Los fluoruros, por mecanismos aun no aclarados, estimulan la formación ósea y son, en consecuencia, usados en el trtamiento de las osteoporisis. Desde un punto de vista terapéutico, uno de los efectos más esperados por la ingesta de fluoruro en pacientes osteoporóticos es la disminución en el índice de fracturas. Si bien esto ocurre, observaciones clínicas sugieren que este efecto es menor que el esperado por el aumento de la mas ósea (ej.: la resistencia por unidad de tejido estaría disminuida en el hueso fluorótico). El o los mecanismos por los cuales el fluoruro conduce a las alteraciones mencionadas, todavía no son bien conocidos, pero como el componente inorgánico ha sido extensamente estudiado, hemos llevado a cabo este trabajo con el objeto de caracterizar cuali y cuantitativamente a los GAG y el colágeno de hueso y cartílago de rata, en función de la ingesta prolongada de fluoruro de sodio. Las variaciónes producidas por la ingesta de fluoruro implican un aumento significativo en al concentración de GAG, después de dos meses de tratamiento, debidas a un incremento en las fracciones correspondientes al condroitín-6-sulfato y dermatán sulfato. Esta modificación en el patrón de distribución de los GAG no es atribuible a variaciones en el peso de las moléculas. aunque otros estudios han informado que no se observan efectos sobre la síntesis de colágeno o de DNA, como consecuencia de la ingesta de fluoruro, nuestros resultados muestran que el contenido de OH-Pro se hall aumentado significativamente luego de 2 meses de tratamiento. Los datos presentados sugieren que las alteraciones óseas inducidas por el fluoruro, podrían ser, al menos en parte debidas a cambios en la concentración y distribución de los GAG y el colágeno en la matriz calcificable de hueso y cartílago de rata (AU)

Modification of the pattern of infection and evolution of cardiopathy in experimental Chagas' disease after treatment with immunosuppressive and trypanocidal drugs

Con el fin de indagar si el tratamiento con drogas de acción inmunosupresora puede inducir un agravamiento o reactivación de la enfermedad de Chagas crónica, si esta eventual reactivación puede ser prevenida por la administración simultánea de una droga tripanomicida y si la inmunosupresión puede modificar la evolución de las alteraciones orgánicas en las que se postula la participación del daño histíco, se estudió la acción de dos drogas de frecuente uso en el humano, Betametasona y Ciclofosfamida, y su asociación con Nifurtimox, sobre la evolución de la infección crônica del ratón con el Trypanosoma cruzi. La administración de Betametasona durante 30 días o de Ciclosfosfamida en dosis espaciadas cada 7 días no produjó mortalidad (Tabla 1), pero incrementó el número de animales que presentaban parásitos circulantes y disminuyó la proporción de ratones que presentaban anticuerpos determinantes de la lisis dependente de complemento de formas sanguíneas circulantes de T. cruzi (Tabla 2). La asociación con Nifurtimox previno el aumento de la incidencia de la parasitemia (Tabla 1). No se observó diferencia en la intensidad de las lesiones histológicas de músculo esquelético y cardíaco entre los animales tratados con Betametasona o Ciclofosfamida con los controles no tratados, en tanto que la asociación con Nifurtimox disminuyó las alteraciones del músculo esquelético pero no las cardíacas (Tabla 3). Llamativamente, la asociación de Betametasona con Nifurtimox redujo de manera significativa la incidencia de las alteraciones elkectrocardigráficas (Tabla 4). Se concluye que la administración de Betmetasona o de Ciclofosfamida reactiva la infección crónica del ratón con T. cruzi, que la administración simultánea de Nifurtimoz previene esa reactivación, y que la asociación de esta droga con Betametasona disminuye la incidencia de las alteraciones electrocardiográficas características de la infección crónica del ratón con T. cruzi

Supression of antibody dependent cytotoxicity to Trypanosoma cruzi in chronic chagasic mice after treatment with nifurtimox

Los fluoruros, por mecanismos aun no aclarados, estimulan la formación ósea y son, en consecuencia, usados en el trtamiento de las osteoporisis. Desde un punto de vista terapéutico, uno de los efectos más esperados por la ingesta de fluoruro en pacientes osteoporóticos es la disminución en el índice de fracturas. Si bien esto ocurre, observaciones clínicas sugieren que este efecto es menor que el esperado por el aumento de la mas ósea (ej.: la resistencia por unidad de tejido estaría disminuida en el hueso fluorótico). El o los mecanismos por los cuales el fluoruro conduce a las alteraciones mencionadas, todavía no son bien conocidos, pero como el componente inorgánico ha sido extensamente estudiado, hemos llevado a cabo este trabajo con el objeto de caracterizar cuali y cuantitativamente a los GAG y el colágeno de hueso y cartílago de rata, en función de la ingesta prolongada de fluoruro de sodio. Las variaciónes producidas por la ingesta de fluoruro implican un aumento significativo en al concentración de GAG, después de dos meses de tratamiento, debidas a un incremento en las fracciones correspondientes al condroitín-6-sulfato y dermatán sulfato. Esta modificación en el patrón de distribución de los GAG no es atribuible a variaciones en el peso de las moléculas. aunque otros estudios han informado que no se observan efectos sobre la síntesis de colágeno o de DNA, como consecuencia de la ingesta de fluoruro, nuestros resultados muestran que el contenido de OH-Pro se hall aumentado significativamente luego de 2 meses de tratamiento. Los datos presentados sugieren que las alteraciones óseas inducidas por el fluoruro, podrían ser, al menos en parte debidas a cambios en la concentración y distribución de los GAG y el colágeno en la matriz calcificable de hueso y cartílago de rata